Как долго LB с дозой антибиотика поддерживает хорошую селекцию?

Различные люди в нашей лаборатории готовят литр или около того LB, добавляют канамицин до 25-37 мг/л для отбора и хранят его при 4 °C для минипрепаратов или других небольших культур (где дозирование прямого LB с запасом 1000X проблематично). ). Некоторые считают, что использовать его после более чем недели сомнительно, но мы обычно используем пластины кан, которым 1-2 месяца, и никаких побочных эффектов.

Как долго LB с антибиотиком, таким как канамицин, хлорамфеникол или ампициллин, могут храниться при 4 °C и поддерживать селекцию?

Ответы (3)

Эта статья Bitesize Bio очень информативна по этому вопросу. Исследование 1970 года , на которое они ссылаются, обнаружило незначительное снижение эффективности небета-лактамных антибиотиков (канамицин, хлорамфеникол) в течение 4 недель или 60 дней. Ампициллин теряет около 10% активности через 4 недели.

В моей лаборатории мы заботимся только о том, чтобы не использовать пластины LB/Amp старше 4 недель, для LB/Km мы храним их при 4 °C более месяца, запечатав в пластиковом пакете.

Насколько я знаю, это нормально. Это температура, при которой Amp регулярно хранится. В любом случае я всегда делаю отрицательный контроль, чтобы убедиться, что мои антибиотики все еще смертельны. Только не кладите его в микроволновку, чтобы сделать тарелки.

Ампициллин разлагается в результате гидролиза (хотя и очень медленно, если не катализируется), с трудом в сухом виде и гораздо легче в растворе.
«Это температура, при которой Amp регулярно хранится» — и фактически Amp действительно теряет активность (несколько % в месяц?) как следствие.

Я не знаю насчет решений, но мы держим чашки LB-Amp/Carb/Gm при 4°C в течение двух-трех недель, и антибиотики, кажется, работают.