Я всегда хотел провести сравнительные экофизиологические исследования, изучая сродство гемоглобина к кислороду популяций в разных средах, но я не могу найти протокол для экспериментального измерения отношения. Кто-нибудь знает, где я могу найти протокол, или сам знает протокол?
Я предполагаю, что ответ будет включать в себя, какие будут необходимые инструменты, в каком состоянии должна быть кровь (свежая?), если гем изолирован (и если да, то как), и как будет выглядеть подходящая схема отбора проб. .
Существуют коммерчески доступные инструменты для измерения кривых насыщения гемоглобина кислородом. Можно использовать цельную кровь или лизированную кровь; Я ожидаю, что инструменты будут поставляться с конкретными указаниями по подготовке образцов, потому что это может зависеть от конкретного оборудования.
Эти устройства используют спектрофотометр для измерения насыщения, используя ту же разницу в цвете между артериальной и венозной кровью, которая видна человеческому глазу.
Чтобы построить кривую, вы начинаете с образца, насыщенного комнатным воздухом или кислородом, и прибор постепенно вводит азот для замены кислорода, одновременно контролируя концентрации кислорода с помощью электрода Кларка.
Вот пример статьи , в которой используется одно из этих устройств. Их точные методы могут соответствовать или не соответствовать вашему исследовательскому подходу.
Рекомендации
Хед, К.А., Бругнара, К., Мартинес-Руис, Р., Качмарек, Р.М., Бриджес, К.Р., Кутер, Д., ... и Запол, В.М. (1997). Низкие концентрации оксида азота повышают сродство серповидных эритроцитов к кислороду in vitro и in vivo. Журнал клинических исследований, 100(5), 1193.
Кара