Это правда, чтобы выбрать 100 объемов более высокой концентрации теста на наркотики?

Мне интересно знать, как найти/оптимизировать концентрацию, необходимую для действия лекарства в клетке. и другой организм

Например, если я использую 1 микромоль для обработки клетки. Должен ли я использовать 10 нМ при использовании C.elegant? как вы определяете или настраиваете такую ​​концентрацию? Пожалуйста, дайте мне ссылку, если есть

Ответы (1)

Обычно при работе с соединениями я исхожу из двух направлений:

Встречается ли препарат в литературе и в какой концентрации они используются?

Я думаю, что быстрый поиск литературы — замечательная вещь, потому что, как и многие проблемы, часто кто-то другой задавал ваш вопрос (что такое правильная концентрация?) и проделывал необходимую работу, чтобы найти вам отправную точку . Я не думаю, что мы можем избежать этой следующей части, особенно если ваше лекарство никогда не использовалось в вашей системе/организме/и т.д.

Титруйте ваше соединение

Почти для всего, даже если производитель имеет в виду число, вы всегда должны титровать для своего собственного применения. У вас не получится просто так, как у другого сыщика, отчасти потому, что вы никогда не зададите тот же вопрос , что и другой сыщик. Тем не менее, хороший поиск литературы может помочь укрепить ваши выводы.

При поиске рабочей концентрации для вашего соединения вы не собираетесь заниматься оптимизацией. Нет смысла искать наилучшую концентрацию , если вы не знаете, какая концентрация работает с самого начала. Как правило, я стараюсь сделать диапазон титров достаточно широким, чтобы я мог видеть, где нежелательно или нет эффекта, поэтому, например, с лекарством я бы попробовал 100 мкМ, 10 мкМ, 1 мкМ, 100 нм, 10 нМ, 1 нМ, 0,1. нМ.

Если вы можете выбрать хорошую рабочую концентрацию, вы можете оптимизировать, используя более жесткие критерии. Например, я считаю, что 10 нМ работает лучше всего; теперь я знаю, что 100 нМ и 1 нМ - это мои максимум и минимум. Могу ли я попробовать 40 нМ, 20 нМ, 10 нМ, 5 нМ, 2,5 нМ.

Важно уменьшить техническую изменчивость, используя одни и те же исходные материалы, такие как количество клеток, для каждого условия, чтобы получить наилучший титр.

Большое спасибо за ваше сообщение. Это определенно хорошо. тем не менее, мой главный вопрос заключается в том, нормально ли, что препарат с наномольярностью работает в клетке, в то время как в 100 раз больше работает, например, в C.elegant? или любая другая модель животного? как я могу это обосновать? у вас есть такой пример? например, когда я использую больше, чем наномолярный, препарат убьет клетку, представьте, что произойдет, если я использую микромолярный. это регулируется? Знаете ли вы какую-либо бумагу с различной концентрацией в клеточной и животной модели?
У меня нет возможности узнать без идентификации наркотика.
например рапамицин
Итак, рапамицин в качестве примера: я, вероятно, нашел бы, что мое использование близко к 10-20 нм в клеточной культуре, что я считаю стандартным. Тем не менее, я могу сразу же найти две ссылки, в которых используется рапамицин в дозах 200 мкМ и 100 мкМ соответственно ( ref1 , ref2 ). В ссылке 1 сделан важный вывод: для C. elegans необходимы более высокие концентрации из-за биодоступности.
Важно отметить, что разные виды имеют разную кинетику использования одного и того же препарата.