Я видел статью, в которой дейтерированная вода использовалась для наблюдения за делящимися клетками. Предполагалось, что дейтерированная вода будет включаться во вновь синтезированные молекулы ДНК. Есть ли прямое включение воды в процесс репликации? Есть ли протонный обмен?
Документ с описанием метода можно найти здесь: http://www.pnas.org/content/105/16/6115.full.pdf
Я бы предположил, что мечение происходит при восстановлении НТФ с образованием dNTPS.
Этот процесс (катализируемый рибонуклеотидредуктазой ) включает протонирование гидроксильной группы на 2'-углероде, что позволяет ему уйти в виде воды, а затем добавление гидрида к вновь образованному карбокатиону. Два атома водорода (протон и гидрид) происходят от двух тиолов фермента, которые в процессе окисляются с образованием дисульфидной связи.
Суть в том, что в присутствии тяжелой воды два тиола быстро обменивали свой водород на дейтерий. Это означает, что гидрид, который добавляется к карбокатиону, будет дейтерием, а полученный dNTP будет помечен дейтерием.
Это единственный этап, на котором я могу представить себе работу мечения, поскольку образуется связь углерод-водород (которая не обменивается быстро с растворителем) с использованием водорода из связи сера-водород (которая быстро обменивается с растворителем). ).
Алан Бойд
WYSIWYG
Злой ученый
панкдора