Я читал:
М. Дрёге, А. Пюлер, В. Сельбичка, «Горизонтальный перенос генов среди бактерий в наземных и водных средах обитания по оценке микрокосма и полевых исследований», Biol. Плодородный. Почвы (1999) 29 стр. 221–245 [PDF]
Я не биолог и пытаюсь понять, как часто прокариоты вносят изменения в свою хромосомную ДНК.
Как часто плазмидная ДНК успешно встраивается в хромосомную ДНК?
Я хотел бы оценить либо количество генных изменений (или, в противном случае, изменений пар оснований), которые бактерия производит в единицу времени. Или, что то же самое, среднее время между такими изменениями.
Трансформация лежит в основе многих лабораторных современных проектов.
Это будет очень неудовлетворительный ответ, и эта запись в Википедии объясняет, почему. Время и успех бактериальной трансформации компетентных клеток сильно различаются в основном в зависимости от нескольких факторов:
С конкретной плазмидой и организмом вы могли бы получить более удовлетворительный ответ, но я полагаю, что ответ даже будет отличаться от лаборатории к лаборатории.
Я работал с микробиологом, который снабдил меня белком в рамках моего проекта с отличием, и я могу поделиться с вами общим впечатлением, которое я получил от них: это случается нечасто. Иногда ни одна из культур, которые вы пытаетесь трансформировать, не включит новую последовательность в свой геном, в других случаях процесс клонирования проходит очень хорошо, и все ваши культуры будут успешно трансформированы. Для нашего проекта действительные колонии были представлены только через неделю с разумным успехом (более половины попыток были успешными). Но вы не знаете, сработало ли преобразование, пока не произошло первое преобразование.
Механизмы, лежащие в основе этого, недостаточно изучены. Если мы возьмем что-то вроде B. subtilis , пожалуй, наиболее академически изученного организма в области трансформации, он может использовать ДНК в качестве пищи или включать ее в свой геном, но никто точно не знает, как это происходит на молекулярном уровне (Chen & Dubnau). , 2004)
Чен, И., и Дубнау, Д. (2004). Поглощение ДНК во время бактериальной трансформации. Обзоры природы. Микробиология, 2 (3), 241–9.
Селена Рутли