Плазмиды могут быть перенесены в E.coli . Эти трансформированные E. coli можно скармливать C. elegans для подавления экспрессии ее генов с помощью РНКи.
Как E.coli может высвобождать РНК-интерференцию для C. elegans ? Даже если мы предположим, что E. coli может проникать в клетки C. elegans как внутриклеточные бактерии, трудно представить, что РНК-интерференция выйдет из E. coli напрямую и войдет в клетки C. elegan ? В норме никакие клетки или бактерии не выделяют РНК или геномный материал за пределы своих клеток?
Да, как ни странно, так и происходит. E. coli экспрессирует двухцепочечную шпильку РНК (под контролем индуцибельного промотора), а РНК содержит последовательность, полученную из гена C. elegans . Когда черви поедают бактерии, они перемалывают их в глотке и высвобождают содержимое клеток (включая индуцированную РНК) в кишечник червей. Клетки кишечника способны поглощать дцРНК и также транспортировать ее в другие клетки. Путь РНК-интерференции обрабатывает ингибирующие РНК для подавления гена-мишени.
УПП
УПП
WYSIWYG