DAPI используется в качестве красителя для гетерохроматиновых и эухроматиновых участков ДНК. Тело Барра гетерохроматично.
На препарате соматических клеток нормальной женской щеки внутри ядра, по-видимому, нет другого отчетливого темного пятна, кроме тельца Барра на внутренней ядерной мембране. - Я использовал старый микроскоп, поэтому мое наблюдение может быть неправильным, как указано в комментарии.
Как из приведенного слайда сделать вывод, что пятно действительно содержит неактивные сателлитные клетки, не используемые генетически?
Почему активная Х-хромосома не видна при том же методе окрашивания? (Вероятно, его можно сделать видимым с помощью какого-либо другого метода окрашивания.)
DAPI (4',6-диамидино-2-фенилиндол) преимущественно связывается с ДНК, богатой AT (хотя он также связывается с ДНК, богатой CG), что может придавать хромосомам отличительные паттерны полос, если они политены или находятся в метафазе. В интерфазных конденсированных хромосомах, таких как неактивные Х-хромосомы самок млекопитающих (тельца Барра), относительно высокая концентрация плотно упакованной ДНК заставляет хромосому выглядеть как более яркое пятно в ядре. Когда ДНК хромосомы деконденсирована (например, остальные хромосомы в интерфазе), она выглядит как более или менее гомогенно окрашенная ДНК в ядре.
Здесь представлена отличная картинка (см. ниже), A — окрашивание DAPI, B — белок, локализованный в тельце Барра, C — РНК (Xist), которая связывает тельце Барра.
Поскольку активная X не конденсирована, она выглядит так же, как и остальные хромосомы, поэтому ее нельзя идентифицировать среди смеси аутосом. Разница во внешнем виде DAPI не имеет ничего общего с активностью как таковой, а скорее с различиями в том, насколько плотно упакованы хромосомы.
Однако я не понимаю первую часть вашего вопроса. По неподвижному изображению нельзя сказать, что тело Барра относительно неактивно. Если бы вы проводили эксперименты на живых клетках, вы могли бы измерить продукцию РНК (используя меченый нуклеотид), иммунофлуоресценцию, чтобы показать локализацию, например, РНК-полимеразы, или репортерные гены, расположенные на неактивных и активных Х-хромосомах. Если вы уточните свой вопрос, я смогу ответить лучше.
КАМ
Лео Леопольд Герц 준영