Техника амплификации белков аналогична ПЦР для ДНК?

Я знаю, что ПЦР можно использовать для амплификации крошечного образца ДНК для проведения экспериментов. Существует ли аналогичный метод для использования с образцом белка? В частности, меня не интересует «разрезание» белка, а просто получение большего количества исходного образца.

Вы не можете амплифицировать белки. Вам просто нужно больше выражать и/или очищать лучше.
Вы можете использовать наборы для трансляции in vitro, но они требуют мРНК в качестве матрицы, а амплификация не является экспоненциальной, как в ПЦР. Не существует биологического механизма для синтеза белков, использующих самих себя в качестве матрицы. Это не похоже на ДНК и РНК.
ПЦР использует полимеразный механизм, который позволяет построить больше нуклеиновой кислоты из матрицы нуклеиновой кислоты. Не существует такого механизма, с помощью которого белок может быть получен из рида белка, так как на самом деле это рибосома, которая производит белок из матрицы нуклеиновой кислоты, верно? Как отмечает канадец, вы можете только надеяться на большее сцеживание и хорошее очищение!
Вытащите ген, сделайте кДНК и клонируйте ее в высококопийный индуцируемый вектор экспрессии. Трансформируйте бактерии или дрожжи и выращивайте культуру под отбором. Пусть они вырастут до 10 ^ 10 или более, а затем вызовут экспрессию. Очистите много-много белка. Если вы не можете получить ген, вы можете взяться за очень сложную задачу секвенирования всего белка. Затем вы делаете синтетическую кДНК из последовательности и используете ее в своем векторе экспрессии. Вы не можете обойти Центральную Догму; ДНК<->РНК->Белок

Ответы (3)

Нет ни одной техники, за одним исключением. ПЦР генерирует ДНК из ДНК, поэтому вы можете установить циклы. Для синтеза белка мРНК является матрицей для производства белков. Скорее всего интересующие вас белки не будут синтезировать мРНК, так что вы не сможете установить циклы.

Исключением, о котором я упоминал ранее, является циклическая амплификация неправильного сворачивания белков (PMCA) . Некоторые белки с неправильной укладкой, связанные с заболеванием, могут индуцировать неправильную укладку того же полипептида, который не имеет неправильной укладки. Таким образом, вы можете установить циклы неправильной реакции.

PS:

Существуют методы синтеза белков из ДНК или РНК, но это не цепные реакции. https://www.promega.com/products/protein-expression/eukaryotic-cell-free-protein-expression/ https://www.neb.com/products/e6800-purexpress-invitro-протеиновый-синтез-набор

Невозможно амплифицировать белок, как ПЦР. ДНК и РНК могут подвергаться ПЦР, поскольку пары оснований комплементарны: AT CG AU. Но аминокислоты не комплементарны; Вы можете найти аминокислоту, которая соответствует глицину? Кроме того, белки представляют собой не только одну полипептидную цепь, такую ​​как ДНК, белки должны быть свернуты после синтеза полипептидной цепи. Обычно молекуле белка требуется более одной полипептидной цепи, чтобы соединиться вместе, чтобы сформировать молекулу белка. Не может быть, чтобы он работал как ПЦР.

Я бы сказал, что невозможное — это с натяжкой. Изобретательный биохимик мог бы создать молекулы, которые «дополняют» каждую аминокислоту, подобно ДНК-полимеразе. Тогда потребуется белок, чтобы обнаружить и перевести это сходство в удлинение белка. Маловероятно, черт возьми, невозможно, нет.

-1. Буквально не существует известного механизма, с помощью которого это можно было бы осуществить. Разработка функциональных белков de novo находится за пределами досягаемости современной биохимии.
Даже если вы преуспеете в этом процессе, белок все равно будет линейным или еще хуже.
существует несколько механизмов для тестирования этой методологии. Зачем кому-то начинать этот процесс de novo? Эволюция как в природе, так и в лаборатории начинается с уже существующего шаблона. И все белки изначально линейны.
Техника амплификации белков аналогична ПЦР для ДНК?
СпросиСетьПолитика конфиденциальности1y, 0v