Я следую протоколу получения белка из клеток кишечной палочки после обработки ультразвуком.
Раньше я выращивал 6 литров крупных культур и добавлял IPTG для экспрессии белка. Я центрифугирую 10 минут при 8000 об/мин и получаю гранулы. Затем я снова обрабатываю ультразвуком и центрифугирую при 20 000 в течение 1 часа.
Мой вопрос: могу ли я сделать последний этап центрифугирования при 4000 об/мин в течение 2 часов? Центрифуга больше не работает на высокой скорости (20 000 об/мин)
Спасибо
Нет, если вы используете только центрифугирование для отделения белков от других частей (бактериальной) клетки, вам потребуются очень высокие центробежные силы. Фактическая скорость (в об/мин), необходимая для отделения растворимых белков от остальной части клетки, в основном зависит от ротора центрифуги, потому что оба вместе определяют получаемое вами ускорение, которое должно составлять не менее 10 000–100 000 об/мин. г.
Если у вас нет (работающей) ультрацентрифуги , вы можете попытаться осадить свои белки из лизата, что позволит вам использовать обычную центрифугу для его сбора. Тем не менее, это не будет вариантом, если ваш белок не может быть правильно свернут, и вам нужно, чтобы он функционировал.
WYSIWYG
gвместоRPM. В основном мы хотим знать центробежную силу, действующую на образец. НеобходимаяRPMдля той или иной величины центробежная сила зависит от радиуса ротора.