Если я буду хранить E. coli , трансформированную плазмидой, при температуре -20°C без приготовления глицеринового раствора, выживет ли она? На самом деле я держал это таким образом в течение 18 часов. Что с ним произойдет? Будет ли он расти на свежих средах?
Я подозреваю, что со временем в колониях будут образовываться кристаллы льда из-за циклов разморозки в морозильной камере и влаги в агаре. Это вызовет разрыв бактериальных мембран и со временем может разрушить основную часть бактериальных клеток. Пластины также со временем высыхают из-за циклов разморозки морозильной камеры. Вы можете оставить их в морозильной камере на некоторое время, но я не могу предвидеть, что они выживут бесконечно.
Если штаммы действительно важны, я рекомендую просто высосать их и потратить небольшое количество времени, необходимое для приготовления запаса глицерина. Глицерин используется в запасах бактерий в качестве криопротектора для предотвращения кристаллизации запасов.
Трегалоза [1] , [2] — это криопротектор, используемый бактериями, чтобы поддерживать работу, когда все остальное замерзает (или высыхает), и они тоже растут в нем!
Трегалоза резко накапливается в микроорганизмах во время теплового шока и осмотического стресса и помогает защитить клетки от термического повреждения и кислородных радикалов. Здесь мы демонстрируем важную роль этого сахара в адаптации бактерий к холоду.
Алан Бойд
шигета