Когда я ищу информацию, связанную с идентификацией генов болезней, тексты часто ссылаются на ген, который «первоначально клонируют». Что означает слово «клон» в данном контексте? Это просто синоним открытия?
Обычно это используется в контексте анализа генов и дальнейшей характеристики. Что делается, так это то, что часть чужеродной ДНК (либо полученная путем переваривания геномной ДНК (например, человека или мыши) или путем амплификации ПЦР) переваривается на конце ДНК, чтобы иметь совпадающие открытые концы с бактериальным вектором.
Затем интересующая ДНК лигируется с вектором, после чего ее можно реплицировать в бактериях и легко выделять с большими выходами. Затем эту плазмиду можно дополнительно проанализировать (путем рестрикционного анализа, секвенирования и т. д.), ген или его промотор манипулировать и мутировать, или, в случае генов, кодирующих белок, ген сверхэкспрессируется в клетках. Все это полезно для анализа функции неизвестных генов. Схематический обзор см. на рисунке (из книги Campbell AP Biology Book, 8-е издание, на этом веб-сайте):
Технически создание клона означает, что вы получаете несколько генетически идентичных дочерних клеток из одного предшественника.
Реми.б
АлисаД
МэттДмо
АлисаД
МэттДмо
АлисаД