Можно ли нокаутировать ген именно в ганглии задних корешков у взрослых млекопитающих? [закрыто]

Поскольку ганглий задних корешков такой маленький, будет ли это легче, чем все тело?

Добро пожаловать в BiologySE — знаете ли вы, как нокаутировать гены всего тела? Или, возможно, тканеспецифический нокаут? Эти вопросы лучше задать, потому что тогда вы поймете, почему важен размер конкретной ткани или органа, а не экспрессия генов конкретного органа. Существует ряд обзорных статей о методах нокаута генов, я бы порекомендовал вам прочитать одну из них, а затем опубликовать более конкретный вопрос, который будет более полезным.
какую именно проблему вы хотите решить?

Ответы (1)

Для создания условного нокаутированного организма требуются две генетические конструкции. Один родитель с трансгеном, который экспрессирует ДНК-рекомбиназу (например, Cre) после промотора гена, который экспрессируется ТОЛЬКО в интересующей вас ткани. Другой родитель содержит представляющий интерес модифицированный ген, подлежащий удалению в присутствии указанной ДНК-рекомбиназы, но в остальном он полностью функционален.

Следовательно, способность нацеливать нокаут на конкретную ткань зависит от идентификации гена, который экспрессируется только в интересующей ткани.

На самом деле легче создать КО целого животного, но поскольку генные продукты могут иметь разные функции во времени в развитии и в разных тканях, КО целого животного может быть летальным, тогда как удаление его в конкретной ткани может быть неэффективным, что позволяет изучать последствия указанного удаления.

Таким образом, если интересующий вас ген был бы летальным при удалении из целого организма, И вы знаете ген, который экспрессируется только в DRG, у вас был бы стимул посмотреть, можно ли получить животное CKO.

Краткий поиск по технологии Cre Lox выдаст тысячи изображений и статей. Вот одна и хорошая иллюстрация:

введите описание изображения здесь

@Hamham, просто примечание об этой технике ... эта техника работает хорошо, но вы можете контролировать время нокаута ... то есть, если вы хотите создать несколько мышей, а затем вызвать экспрессию фермента Cre у взрослого животного. (если у вас есть индуцируемая система Cre), вы можете это сделать; однако, если Cre экспрессируется у эмбрионов во время развития, то ген будет отсутствовать с рождения и может иметь другой фенотип по сравнению с тем, если нокаут гена индуцируется у взрослого животного.
@VanceLAlbaugh Можно ли заменить часть «если вы хотите сделать несколько мышей» на «если вы поймаете несколько диких мышей»? Ака, в отличие от картинки выше, я могу просто использовать любую мышь без трансгенных родителей и вызвать у нее нокаут гена...? Спасибо!
@Hamham Нет, это не будет успешным с дикими мышами - вы должны использовать штаммы лабораторных мышей, для которых известна информация о последовательности ДНК. Как указано выше, идея состоит в том, чтобы скрещивать одну линию мышей, которая имеет сайты loxP, фланкирующие интересующий ген, с другой линией, которая экспрессирует фермент рекомбиназы Cre, специфичный для ткани/клетки. Существуют и другие технологии для нокаута (например, CRISPR en.wikipedia.org/wiki/CRISPR ); но опять же, это для начала разведения мышей, а не для выбивания гена у взрослой мыши
Можно ли нокаутировать ген именно в ганглии задних корешков у взрослых млекопитающих? [закрыто]
СпросиСетьПолитика конфиденциальности1y, 0v