Я хотел бы оптимизировать экспрессию фрагмента Fab в Escherichia coli . Для индукции промотора lac на векторе pAK400 я использую IPTG и сахарозу. Нужно ли оптимизировать выражение, если я просто добавлю IPTG?
Вы можете индуцировать lac оперон двумя вещами: лактозой (или, точнее, аллолактозой, ее метаболитом) и аналогами лактозы, которые не метаболизируются бактериями.
Лактоза индуцирует экспрессию и метаболизируется, в то время как IPTG не является мишенью -Галактозидаза и даст вам сильную и постоянную индукцию. Сахароза не оказывает никакого влияния на промотор.