Как изменение концентрации трис-буфера повлияет на активность фермента амилазы?

Например, если вы увеличиваете количество триса, но рН все еще не меняется, будет ли активность фермента продолжаться нормально? Если он изменит рН, изменит ли он структуру фермента и почему?

Я новичок в биологии, но поиск в Google «амилазы ph» привел к рекомендуемому pH 7,0 для «альфа-амилазы поджелудочной железы человека». Так не будет ли это зависеть от рН трис-буфера, о котором я забыл, поскольку существует множество различных видов трис-буферов? Поиск в Google «Трис» привел к странице в Википедии с pH 8,0. Итак, учитывая эту информацию, не будет ли у него меньше функциональности?
Приведет ли увеличение количества триса, но без изменения рН, к чему-нибудь значительному?
Честно говоря, я бы не знал. Но увеличение количества триса вызовет изменение рН, не так ли? Если вы не хотите сбалансировать его чем-то основным или кислотным? И тогда в таком случае я бы еще не знал. Я всегда думал, что ТРИС используется только для получения оптимального pH для ферментов и т.п., и pH был причиной его использования.
Предполагая, что Трис химически инертен к реакции, более высокое количество Триса будет увеличивать буферную способность (т. е. рН изменяется меньше).

Ответы (2)

Я понимаю, что опоздал на 4 года, но хотел дать ответ на этот вопрос. По-видимому, трис часто оказывает ингибирующее действие на активность амилазы. Добавление большего количества Трис приведет к конкурентному ингибированию с субстратом и исказит результаты.

Связывание триса с альфа-амилазой Bacillus licheniformis может влиять на активность гидролиза крахмала https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18289113

После 4 лет работы в области энзимологии я сказал, что трис действительно сложен, прежде всего, когда вы используете больше триса, чтобы сохранить pH на том же уровне, что и раньше, вам нужно будет повторно отрегулировать pH, так как трис составляет около 9, но большинство ферментов работают вокруг. от 6 до 7,5 (для альфа-амилазы это 5,8), если вы этого не сделаете, ваш фермент не будет работать должным образом, ему нужен очень низкий или высокий уровень pH, чтобы разрушить трехмерную структуру фермента, поэтому мы можем просто сказать, что он потеряет свою функциональность, если вы отрегулируйте pH, высокая концентрация может вызвать некоторые проблемы, такие как окружение вычитаемой здесь амилазы и не позволяет ей соединиться с ферментом, в некоторых случаях кислота, которую вы используете для регулировки pH, оказывает токсическое воздействие на ферментный хлор в этом случае, но я уверен, что лучший способ - это оптимизация понять реакцию. С наилучшими пожеланиями .

Как изменение концентрации трис-буфера повлияет на активность фермента амилазы?
СпросиСетьПолитика конфиденциальности1y, 0v