Я подумывал начать небольшой частный исследовательский проект. В этом проекте мне нужно выяснить, является ли человек гомозиготным по определенному аллелю. Причина этого в том, что я действительно пытаюсь выяснить, есть ли мутация, которая заставляет его/ее не производить этот хемокин. Таким образом, мне нужно легко определить, какие люди являются «нормальными», у каких людей есть мутация в одной хромосоме, а у каких людей есть мутация в обеих. Около 1% населения имеют мутацию в обеих хромосомах.
Букварь, AFAIK, не сможет отличить гетерозиготных от «нормальных» людей.
Кто-нибудь знает, как к этому подойти?
Вы можете использовать стратегию 3-х праймеров, где у вас есть общий праймер, один из которых амплифицирует только мутантный аллель, а другой амплифицирует только wt. Это может быть или не быть осуществимым в зависимости от типа мутации. ДНК гетерозиготных людей будет амплифицировать оба продукта, в то время как гомозиготные будут амплифицировать только один (wt или мутантный).
Конечно, тогда связать мутацию гена с отсутствием хемокина не обязательно просто.
Однако, если честно, я бы использовал другой подход: взять людей, которые не производят хемокин, и людей, которые производят (просто вводя хемокин в кровь). Теперь секвенируйте ген в двух группах и ищите мутации.
DQdlM
Педери