Какой тип камеры требуется для фотографирования люциферазы?

Я работаю с люциферазой , которая имеет длину волны синего цвета 480 нм, и я хочу иметь возможность сфотографировать ее. Проблема в том, что я вижу перед собой люциферазу, сияющую во всей красе, но, как бы я ни старался, я не могу сфотографировать люциферазу на мою зеркальную камеру (Nikon D80) с объективом Nikon 50 мм. и объектив Nikon 35 мм. Я пробовал снимать фильтры (Nikon L37 и Hoya UV).

Мне любопытно, не хватает ли мне определенного объектива/фильтра или мне следует снимать с другой настройкой освещения. Я уже экспонирую на 30" при f/22 на ISO 1600. Может, дольше?

Какая у вас схема освещения?
Я подозреваю, что требуется намного, гораздо больше времени экспозиции (. И в абсолютной темноте . То же самое, например, при фотографировании звезд ночью. Я думаю, EV -5/-6, поэтому вам нужно гораздо больше остановок, чтобы исправить это. Поэтому установите ISO на Например, 400 и начните с выдержки 1 минута при диафрагме F/4.0. Что-то видно? Уменьшите время на 1 стоп, ничего не видно? Увеличьте до 800 iso и т. д., поиграйте с ISO и временем, чтобы сохранить качество.
В затемненной комнате. как яркость сравнима со светящимися часовыми метками на циферблате наручных часов? Смотрите мое изображение ниже. Я подозреваю, что ваша люцифераза должна быть ярче этого.
Люцифераза на самом деле будет тусклее, чем наручные часы (в зависимости от концентрации). Я использую полностью темную комнату.
Я понял, что я идиот и двигался не в том направлении с диафрагмой. Теперь я могу делать довольно приличные фотографии.
Нет, не идиот, ты был достаточно умен, чтобы обратиться к нам за помощью, лол! Рад, что теперь это работает.

Ответы (2)

Эта длина волны, безусловно, находится в пределах спектра, который вы можете захватить любым объективом, с фильтрами или без них. Цифровые датчики захватывают диапазон 350-1000 нм . Если он светится, то вы бы хотели, чтобы он был вашим основным источником света. Любой дополнительный свет, который вы бросите на него, ослабит свечение вашего объекта и затруднит его просмотр.

Какую диафрагму вы используете? Если это не невероятно тускло, я не могу представить, что 30-дюймовый объектив не захватит что-то, если только вы не используете очень маленькую диафрагму.

Вы делаете это в темной комнате с темным фоном? Что вы видите на своих 30-дюймовых кадрах?

Путем проб и ошибок вы можете изменить диапазон выдержек (и ISO), чтобы попытаться отточить хорошее значение экспозиции. Если вы можете увидеть его глазами, вы должны быть в состоянии сфотографировать его без специального оборудования.

Я использую f22, ISO 1600. Меня тоже это смущает.
О господи, f/22 — это ваша проблема. f/22 с 30 секундами точно не получится. Откройте как можно шире ( меньшее значение f ) — по крайней мере, для начала. f / 22 в основном означает, что свет проходит через крошечное отверстие.

Если у вас есть другой свет, он может легко «размыть» низкоуровневую люминесценцию. У вас не должно быть другого источника света для начала.

Фокус с включенным светом. Либо используйте ручную фокусировку, либо, если ваша камера позволяет, установите ручную фокусировку, временно переключитесь на автофокусировку, сфокусируйтесь, а затем вернитесь к ручной фокусировке, чтобы камера сфокусировалась.

Затем выключите другое освещение, чтобы люцифераза была единственным источником света, экспонируйте оттуда и посмотрите, что получится.

Если это не сработает, ручная экспозиция, а также ручная фокусировка позволяют вам контролировать то, что делает камера, и выставлять экспозицию в диапазоне вероятных экспозиций.

Только что попробовал сфотографировать свой не особо ярко светящийся циферблат наручных часов в полной темноте. На расстоянии 250 мм и на расстоянии примерно 500 мм, чтобы часы заполнили 1/3 ширины кадра, экспозиция составила 6 секунд при f5,6 при 800 ISO. Отдельные часовые метки, не очень яркие для глаз при комнатном освещении, ярко светятся на фотографии, когда они являются единственным источником света.

Таким образом. Фокусировка "могла бы быть намного лучше [tm] :-)

6S, f5.6, ISO800.

введите описание изображения здесь

Ключевые вопросы: используете ли вы другое освещение и что вы видите на своих изображениях.

Эти многочисленные изображения люциферазы предполагают разумный уровень освещенности и не выглядят так, будто их сложно сфотографировать.

Какой тип камеры требуется для фотографирования люциферазы?
СпросиСетьПолитика конфиденциальности1y, 0v