Почему клеточные линии замораживаются в паровой фазе?

Для большинства клеточных линий, с которыми я сталкивался, ATCC рекомендует хранить их в паровой фазе жидкого азота. Я имею в виду любое место выше уровня жидкости в резервуаре для хранения азота. Что является причиной этого? При каких условиях/требованиях можно хранить клетки/ткани, погруженные в жидкость?

Ответы (1)

Само хранение может осуществляться как в жидкой, так и в паровой фазе в жидком азоте. Оба имеют свои преимущества и недостатки. По моему опыту, есть две основные причины, по которым рекомендуется хранение в паровой фазе (хотя возможны колебания температуры при низком содержании азота).

Во-первых, вы избегаете перекрестного заражения ваших клеточных линий микоплазмой (и возможными другими загрязнителями), которые могут попасть в фазу жидкого азота, а затем в другие ваши культуры. Это не теоретическая опасность, а вполне реальная. См. документы в ссылке ниже.

Затем в ваши криопробирки попадет жидкий азот (что также является причиной загрязнения). Если вы используете пробирки, которые специально не предназначены для такого типа хранения (что не является проблемой для хранения в паровой фазе), то жидкий азот, попавший в пробирку, расширится при оттаивании и может привести к взрыву пробирки. Это может привести к травмам. Подробнее см. здесь и здесь .

Использованная литература:

  1. Риск контаминации гермоплазмы при криоконсервации и криобанкировании в отделениях ЭКО.
  2. Микробное заражение эмбрионов и спермы при длительном хранении в жидком азоте
Я не думаю, что может быть проблема заражения микоплазмой, но возможно с вирусами.
Это может случится. Микоплазма может выживать в жидком азоте в течение очень длительного периода времени, а затем вызывать заражение. Был там, видел это. Нам пришлось отказаться от целого набора клеток.
Так как же клеточные мембраны/вирусные белки справляются с жидким азотом? Я предполагаю, что азот является неполярным растворителем, но будет ли его достаточно, чтобы разрушить бислой фосфолипидов?
Он действительно неполярный. Но это не разрушит слои мембраны, так как они имеют полярные группы снаружи (неполярные хвосты направлены внутрь мембраны). В противном случае мы не могли бы хранить там какие-либо ячейки. Кроме того, эти клетки выживают, поскольку другие клетки замерзают там. Поскольку они более просты, чем эукариотическая клетка, у них больше шансов выжить.
Определенно прав насчет проблем с мико, я потерял почти тысячу таких образцов. Я хотел бы, чтобы они сделали эти дьюеры способными вместить больше n2. Крис хороший ответ здесь.
Почему клеточные линии замораживаются в паровой фазе?
СпросиСетьПолитика конфиденциальности1y, 0v