Можно ли выдержать переваривание клеток буфером для лизиса несколько дней при -20 градусах, а затем приступить к очистке фенол-хлороформ-изоамил?
Должно быть хорошо, но на вашем месте я бы потратил еще несколько минут и продолжал до осаждения этанола (в худшем случае 15 минут работы). Вот протокол: https://www.thermofisher.com/pl/en/home/references/protocols/nucleic-acid-purification-and-analysis/dna-extraction-protocols/phenol-chloroform-extraction.html
Вы можете хранить его при -20 градусах в течение нескольких дней (продлить инкубацию в течение ночи, это второй этап осаждения этанолом), и вы будете уверены, что он останется в порядке. На самом деле, замораживание в большинстве буферов, будь то буферы для лизиса или буферы для экстракции, не должно существенно повредить нуклеиновые кислоты. Из моего личного опыта: я заморозил растительный материал в экстракционном буфере для выделения РНК (метод TRI-zol) при -80 в течение нескольких дней и в итоге получил очень высокие концентрации в большинстве образцов. Мне сказали, что замораживание при -20 повлияет на качество, но РНК, как правило, менее стабильна, чем ДНК.
Если у вас было мало материала или совсем его не было, вам лучше провести процедуру осаждения, а затем заморозить его. Если это мизерные суммы и/или вы работаете с чем-то деликатным, например, с доказательствами судебной экспертизы, выполнение процедуры будет наиболее разумным решением.
арбовирусный