Представьте, что мы сейчас в 1983 году (когда был открыт ВИЧ), в то время не было современных машин для секвенирования массивного генома, извлеченного из крови. Была странная болезнь, и никто не знает, что ее вызвало, то ли вирус, то ли бактерия, то ли что-то еще... Так как же тогда ученые узнали о ВИЧ?
-- Обновление: я просто думаю, что они извлекли РНК из крови тех пациентов, у которых были те же симптомы, и использовали электрофорез, чтобы выяснить, существует ли большой фрагмент ARN, указывающий на то, что они были инфицированы вирусом, это правда?
ВИЧ был идентифицирован как инфекционное заболевание с помощью классической эпидемиологии, а вирус был идентифицирован с помощью классической вирусологии.
Я не буду вдаваться в эпидемиологию, но вкратце все прошло примерно так, как и следовало ожидать — был выявлен набор симптомов, проанализированы характеристики пациентов, выявлена заразная природа симптомов, и все это с помощью стандартных подходов к отслеживанию пациентов. и так далее.
Что касается идентификации вирусов, то это было задолго до появления современных молекулярных методов. Это было еще до того, как ПЦР стала коммерчески доступной! Таким образом, использовались методы классической микробиологии.
Наиболее вероятным казалось, что возбудитель был вирусом, а не бактерией (хотя были рассмотрены все возможные аспекты), и почти каждый вирусолог пытался найти свой любимый возбудитель, но ретровирусы также казались логичными кандидатами, и несколько групп пытались изолировать инфекционные агенты от вирусов. кровь больных СПИДом.
Двумя наиболее успешными группами были Люк Монтанье и Роберт Галло. Оказалось, что в этом замешано много политики и личностей, и я не буду вдаваться в подробности. Вот несколько комментариев от Монтанье, резюмирующих эту историю:
Во Франции было всего несколько пациентов с этим заболеванием, но идея Галло о том, что причиной был ретровирус, уже пересекла Атлантику. Его идея была распространена небольшой группой клиницистов и иммунологов во главе с Жаком Лейбовичем и Вилли Розенбаумом. В конце 1982 года Франсуаза Брун-Везине, моя бывшая ученица и член этой группы, предложила нам сотрудничать, чтобы выяснить, не является ли ретровирус причиной этого заболевания, которое теперь называется СПИДом.
Мы были готовы начать, потому что моя лаборатория была оборудована для поиска лимфотропных ретровирусов в культурах Т-клеток человека. ... 3 января 1983 года Франсуаза Брюн-Везине получила биопсию лимфатического узла у одного из пациентов Розенбаума ... Я измельчил лимфатический узел, диссоциировал фрагменты на отдельные клетки и культивировал Т-лимфоциты с интерлейкином-2 и антисывороткой. к интерферону человека. Пятнадцать дней спустя Франсуаза Синусси (тогда еще Барре-Синусси) обнаружила первые следы ОТ в супернатанте культуры лимфоцитов, указывающие на присутствие ретровируса. ... Несколько месяцев спустя я получил образец крови от молодого больного гемофилией (LOI) с развившимся СПИДом, а также образцы крови и лимфатических узлов от молодого гея (LAI) с запущенной саркомой Капоши. Вирус LAI может быть выделен от пациента.
Новые доказательства того, что этот странный ретровирус был причиной СПИДа, были получены от нашей группы осенью 1983 г. и зимой 1984 г. (7). Мы наблюдали высокую частоту антител к вирусу у больных лимфаденопатией и отмечали благоприятный тропизм этого вируса к CD4+ Т-лимфоцитам. Однако наши результаты по-прежнему вызывали споры, и нам было трудно получить финансирование, необходимое для лучшей характеристики вируса и разработки анализа крови. Ситуация изменилась только во Франции, когда Роберт Галло и его группа в Соединенных Штатах сделали аналогичное открытие. Весной 1984 года Галло опубликовал более убедительные доказательства того, что ВИЧ вызывает СПИД...
Подход Галло был аналогичным — он был сосредоточен на выделении реплицирующегося вируса, а не на выполнении молекулярной биологии, ставшей стандартом за это время.
епископ
анонгудняня