Почему высокая концентрация ЭДТА вызывает набухание тромбоцитов?

Как сообщается в старой статье Дж. Г. Уайта 1968 года :

Хелатирование мембранного кальция ЭДТА, по-видимому, вызывает заметные нарушения в стенке тромбоцитов и массивный отек канальцевой системы. Набухание внутренних каналов является доминирующим изменением тромбоцитов с ЭДТА, и это изменение, по-видимому, в конечном счете связано с разрушением гранул тромбоцитов.

Многие статьи следовали описанной выше, но, по-видимому, основной причиной набухания тромбоцитов в присутствии ЭДТА является снижение уровня кальция, что вызывает своего рода активацию тромбоцитов.

Эта активация также может быть связана с прямым действием ЭДТА, как сообщается в этой статье Golański et al. :

Влияние ЭДТА на динамику мембран тромбоцитов близко имитировало изменения, вызванные взаимодействием фибриногена с GPIIb-IIIa тромбоцитов. Таким образом, EDTAK2-индуцированная активация тромбоцитов может быть результатом вмешательства в структуру и конформацию белка мембраны тромбоцитов и, возможно, связана с « неспецифическим » запуском пути передачи сигнала.

В любом случае, в нормальных условиях лабораторное количественное определение объема тромбоцитов с использованием пробирок с ЭДТА, по-видимому, не повлияет, если оно будет выполнено через 1 час после сбора (как сообщается в этой статье Dastjerdi et al. ).

Я думаю, что ваш вопрос основан на двух совершенно разных определениях «высокого» ЭДТА. Действительно, обе концентрации «высокие», но одна из них «действительно очень высокая».

Единственные ссылки (например, здесь или здесь ), которые я вижу, говорят об осмотических эффектах ЭДТА в контексте сбора образцов крови, и особенно когда слишком маленький объем втягивается в большую пробирку, например, 0,5 мл крови. в тубе 5мл. В этом случае жидкость (кровь) добавляют к твердому порошку ЭДТА, находящемуся в пробирке. Это уже высокая концентрация ЭДТА, ее достаточно, чтобы вытереть весь кальций вокруг, чтобы предотвратить коагуляцию.

Тем не менее, если вы заполните пробирку только на 10 %, в предварительном объеме порошка ЭДТА будет в 10 раз больше , чем необходимо для предотвращения образования тромбов. Это не просто много, это невероятно много. ЭДТА обычно представляет собой калиевую соль в этом контексте, так что она может достигать ~ 100 мОсм, что определенно вызывает осмотические эффекты, но это примерно в 10 раз более высокая концентрация, чем ваша ссылка для тромбоцитов (что я не могу сказать). доступ к сожалению). Когда вы указываете в своем вопросе:

Я знаю, что высокая концентрация ЭДТА повышает осмолярность плазмы, что приводит к сморщиванию клеток.

... это кажется лучшим объяснением, если вы не можете показать другую ссылку, которая демонстрирует существенное сокращение клеток при более низких концентрациях (~ 2 мг / мл). Я не говорю, что на этом уровне не может быть какого-то осмотического эффекта, просто он будет составлять всего пару процентов от объема клетки и не будет заметен ни при каких анализах, кроме самых тонких.

Тогда, с другой стороны уравнения, воздействие на тромбоциты связано не с осмотическими эффектами, а скорее с несколько парадоксальной активацией тромбоцитов, как в ответе @DavideN. Думайте о тромбоцитах как о клетках, которые «приготовлены» к расширению, когда это необходимо для остановки кровотечения; в некоторых обстоятельствах кажется, что ЭДТА может быть триггером для этого процесса, но не в других (опять же, см. противоречивые ссылки @DavideN).

Использованная литература:

Гуссенс, В., ДЮППЕН, В., и Вервилген, Р.Л. (1991). K2-или K3-ЭДТА: антикоагулянт выбора в рутинной гематологии? Международный журнал лабораторной гематологии, 13(3), 291-295.