Я не могу использовать HRP, так как мои субстраты мешают ему, и мне нужен метод в реальном времени, потому что я хочу измерить кинетические параметры некоторых оксидаз.
Амперометрическое определение H2O2 может выполняться без HRP и дает показания с высоким разрешением в реальном времени.
Вы найдете множество различных типов электродов, которые используются в литературе для обнаружения H2O2, включая, например, микроэлектроды из угольной пасты, покрытые MnO2, или золотые электроды, дериватизированные цитохромом с .
Также существуют коммерческие электроды. Например, эти от WPI основаны на дериватизированных углеродных волокнах (хотя они не уточняют, на каких, так что я бы не стал исключать HRP...)
Другим вариантом является использование чувствительного к H2O2 красителя H2DCF (дигидродихлорфлуоресцеин).
Для чисто химического анализа диоксид марганца (MnO2) будет реагировать с образованием кислорода из перекиси водорода , что можно обнаружить спектроскопически или с помощью прямого химического анализа.
Я думаю, что ферментативный анализ менее опасен для окружающей среды и напрямую дает колориметрические результаты, возможно, поэтому он так распространен.
Чтобы измерить кинетические параметры оксидаз, вы также можете напрямую измерить концентрацию кислорода. Датчики кислорода гораздо более распространены, чем датчики H2O2, и я знаю, что доступны небольшие установки (образцы объемом 1 мл) на основе зонда на основе флуоресцентного красителя.
Ник
мргорефест