В чем разница между трансформацией и трансфекцией? Как работают оба этих метода?
Если вы интересуетесь историей молекулярной биологии, это интересный вопрос.
В основном трансформация стала использоваться для описания экспериментов, в которых фенотип организма изменялся за счет поглощения ДНК, и из-за того, как это развивалось в бактериальных системах, эта ДНК обычно представляла собой плазмиду. Затем появилась возможность использовать очищенную фаговую ДНК для заражения клеток, при этом «трансформированные» клетки продуцировали фаговые частицы — по понятным причинам это называлось трансфекцией.
Когда усилия обратились к тому, чтобы использовать те же методы, работающие с культивируемыми клетками животных, многие из векторов были основаны на вирусных геномах (например, SV40), и эти исследователи называли это трансфекцией. В этот момент различие между двумя терминами стало бессмысленным, и их использование, как правило, связано с историческими причинами. Интересно, что в молекулярных манипуляциях с дрожжами, где нет вирусов, слово трансфекция используется редко.
Насколько мне известно (и я не нашел доказательств против этого), это в основном семантическая разница. Оба процесса описывают добавление генетического материала в клетки с использованием различных методов.
Трансформация здесь в основном используется для работы с бактериями (например, трансформация плазмид), в то время как трансфекция используется почти исключительно для эукариотических клеток. Причина может заключаться в том, что термин «трансформация» используется и в эукариотических клетках для описания превращения клеток в раковые.
Техники не сильно отличаются и их очень много. При трансфекциях часто используются агенты трансфекции, которые образуют поры в клеточной мембране, через которые ДНК может проникнуть в клетку. Это также можно сделать с помощью короткого электроимпульса. Многие преобразования выполняются с использованием «химически обработанных» клеток, когда клетки доводятся до состояния, в котором они поглощают ДНК, которая прилипает к их внешней стороне.
Статьи Википедии о Трансфекции и Трансформации дают вам более подробную информацию о методах.
пользователь560
Алан Бойд
пользователь560
WYSIWYG